生物 SEM 样品准备的全面指南156

简介

扫描电子显微镜 (SEM) 是生物学中一种广泛使用的成像技术，可提供详细的样品表面信息。然而，为 SEM 分析准备生物样品是一个至关重要的步骤，需要仔细执行以获得高质量的图像。本文提供了一个全面的指南，介绍了生物 SEM 样品准备的各个方面，包括固定、脱水、干燥和涂层。

样品固定

样品固定是 SEM 样品准备的第一步，用于在分析前保存样品的结构和完整性。常见的固定剂包括戊二醛、福尔马林和戊四氧化锇。选择合适的固定剂取决于样品的类型和所需的信息。固定应在低温下进行以防止细胞损伤或人工制品。

脱水

固定后，样品需要脱水以去除水分并允许电子束穿透。最常用的脱水方法是乙醇梯度，其中样品通过一系列递增浓度的乙醇溶液进行。乙醇可溶解脂质，使其易于在干燥过程中去除。脱水过程通常需要几个小时，并且必须仔细监测以防止样品收缩或变形。

干燥

脱水后，样品需要干燥以去除残留的乙醇。最常用的干燥技术是临界点干燥，其中样品浸入液态二氧化碳中。二氧化碳在临界点以上被置换，使样品快速干燥而不会损坏其结构。

涂层

干燥后，样品需要涂上一层导电材料以防止电子束充电。最常用的涂层材料是金或碳。涂层厚度应足以导电，但又薄到足以保留样品的细节。涂层应在真空室内进行，以防止样品受污染。

特殊考虑

某些生物样品，如植物组织或微生物，需要特殊考虑。植物组织通常含有较高的水含量，需要更长的脱水时间。微生物和细胞培养物通常较小且脆弱，需要小心处理以防止损坏。

质量控制

SEM 样品准备的质量控制至关重要，以确保获得高质量的图像。应使用合适的试剂并严格遵守协议。应定期检查样品以监测固定、脱水和干燥过程中的任何问题。如果样品出现收缩、变形或污染，则需要重复处理步骤或使用不同的方法。

生物 SEM 样品准备是一个多步骤的过程，需要仔细执行以获得高质量的图像。遵循本指南中概述的步骤将有助于确保样品保留其结构和完整性，并提供准确的表面信息。通过实施适当的质量控制措施，可以优化 SEM 分析结果的可靠性和准确性。

2025-01-31

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