SEM扫描电镜样品制备：终极指南389

引言

扫描电子显微镜（SEM）是一种强大的显微镜技术，可以产生材料样品表面高分辨率的图像。为了获得准确且可解释的结果，为SEM分析准备样品至关重要。本文将提供一个分步指南，介绍SEM样品制备的最佳实践，包括样品收集、固定、脱水和涂层。

选择合适的样品：选择代表感兴趣区域的样品。考虑样品的尺寸、形状、成分和表面的清洁度。

小心处理：使用适当的工具和技术小心处理样品，避免损坏表面或引入污染物。

记录样品信息：记录每个样品的类型、位置和处理条件，以便将来参考。

目的：固定生物样品可防止组织分解，并保留其原生结构。

试剂：常用的固定剂包括戊二醛、甲醛和乌拉镍。选择合适的固定剂取决于样品的类型。

程序：将新鲜组织浸入固定剂溶液中，按照制造商的说明进行操作。固定时间和温度将取决于组织类型和样品尺寸。

目的：脱水是将样品中的水置换为有机溶剂，为SEM成像做好准备。

试剂：常用的脱水剂包括乙醇、异丙醇和丙酮。使用递增浓度的脱水剂系列。

程序：将样品浸泡在逐渐增加浓度的脱水剂系列中，每次浸泡几小时。在每个步骤中彻底冲洗样品以去除残留的脱水剂。

目的：临界点干燥是一种温和的干燥方法，可防止样品在传统干燥过程中收缩或变形。

设备：需要一个临界点干燥器，这是专门用于该目的的装置。

程序：将样品装入干燥器，并用过渡液（通常是液态二氧化碳）填充腔室。缓慢增加腔室中的压力和温度，直到达到临界点，液体和气体相变成一相。然后释放压力，液体二氧化碳从样品中蒸发，留下干燥的样品。

目的：涂层是一种薄而导电的金属层，覆盖在样品表面。它允许电子束与样品相互作用，从而产生图像。

材料：常用的涂层材料包括金、铂和碳。材料的选择取决于样品类型和所需的分辨率。

技术：涂层通常通过溅射或蒸发的真空沉积技术进行。溅射涉及轰击目标金属，蒸发则涉及加热金属使其蒸发。

空白样品：处理空白样品（例如未涂层的衬底）以监测样品制备过程中的污染。

重复样品：制备重复样品以评估结果的可重复性。

成像标准：建立成像标准，例如分辨率、对比度和噪声级别，以确保图像质量的一致性。

图像质量差：检查涂层厚度、加速电压、倍率设置和样品清洁度。

样品损坏：调整固定、脱水或临界点干燥程序，以最大程度地减少对样品的损坏。

污染：检查样品制备中的所有步骤，并采取措施减少污染。

遵循这些最佳实践，您可以为SEM分析制备高质量的样品。通过仔细的样品收集、适当的固定、彻底的脱水、临界点干燥和均匀的涂层，您可以获得准确且可解释的图像，揭示您样品的隐藏细节。

2024-11-11

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