SEM扫描电镜样品制备:终极指南389
引言
扫描电子显微镜(SEM)是一种强大的显微镜技术,可以产生材料样品表面高分辨率的图像。为了获得准确且可解释的结果,为SEM分析准备样品至关重要。本文将提供一个分步指南,介绍SEM样品制备的最佳实践,包括样品收集、固定、脱水和涂层。
选择合适的样品:选择代表感兴趣区域的样品。考虑样品的尺寸、形状、成分和表面的清洁度。
小心处理:使用适当的工具和技术小心处理样品,避免损坏表面或引入污染物。
记录样品信息:记录每个样品的类型、位置和处理条件,以便将来参考。
目的:固定生物样品可防止组织分解,并保留其原生结构。
试剂:常用的固定剂包括戊二醛、甲醛和乌拉镍。选择合适的固定剂取决于样品的类型。
程序:将新鲜组织浸入固定剂溶液中,按照制造商的说明进行操作。固定时间和温度将取决于组织类型和样品尺寸。
目的:脱水是将样品中的水置换为有机溶剂,为SEM成像做好准备。
试剂:常用的脱水剂包括乙醇、异丙醇和丙酮。使用递增浓度的脱水剂系列。
程序:将样品浸泡在逐渐增加浓度的脱水剂系列中,每次浸泡几小时。在每个步骤中彻底冲洗样品以去除残留的脱水剂。
目的:临界点干燥是一种温和的干燥方法,可防止样品在传统干燥过程中收缩或变形。
设备:需要一个临界点干燥器,这是专门用于该目的的装置。
程序:将样品装入干燥器,并用过渡液(通常是液态二氧化碳)填充腔室。缓慢增加腔室中的压力和温度,直到达到临界点,液体和气体相变成一相。然后释放压力,液体二氧化碳从样品中蒸发,留下干燥的样品。
目的:涂层是一种薄而导电的金属层,覆盖在样品表面。它允许电子束与样品相互作用,从而产生图像。
材料:常用的涂层材料包括金、铂和碳。材料的选择取决于样品类型和所需的分辨率。
技术:涂层通常通过溅射或蒸发的真空沉积技术进行。溅射涉及轰击目标金属,蒸发则涉及加热金属使其蒸发。
空白样品:处理空白样品(例如未涂层的衬底)以监测样品制备过程中的污染。
重复样品:制备重复样品以评估结果的可重复性。
成像标准:建立成像标准,例如分辨率、对比度和噪声级别,以确保图像质量的一致性。
图像质量差:检查涂层厚度、加速电压、倍率设置和样品清洁度。
样品损坏:调整固定、脱水或临界点干燥程序,以最大程度地减少对样品的损坏。
污染:检查样品制备中的所有步骤,并采取措施减少污染。
遵循这些最佳实践,您可以为SEM分析制备高质量的样品。通过仔细的样品收集、适当的固定、彻底的脱水、临界点干燥和均匀的涂层,您可以获得准确且可解释的图像,揭示您样品的隐藏细节。
2024-11-11
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