载玻片SEM制样技术的详细指南79

概述

扫描电子显微镜 (SEM) 是一种强大的显微技术，可提供物体的详细表面图像。为 SEM 准备好样品需要遵循特定的程序，其中包括载玻片制备。本文将深入探讨用于 SEM 制样的载玻片制备方法，包括材料选择、样品固定、脱水和包埋。

材料选择

用于载玻片的材料必须具有以下属性：1）与样品兼容，不与样品起化学反应；2）耐电子束，不会在显微成像过程中损坏；3）尺寸合适，方便显微镜装载。

样品固定

固定是样品制备过程中必不可少的一步，可防止样品在后续步骤中分解。对于 SEM，可以使用化学固定剂，例如戊二醛和福尔马林，或物理固定剂，例如冷冻或高压冷冻。

脱水

固定后的样品需要脱水，以去除多余水分，防止在显微成像过程中形成冰晶。脱水通常通过逐渐增加乙醇或丙酮的浓度来实现。样品依次浸泡在不同浓度的脱水剂中，直到达到 100% 的脱水剂。

包埋

脱水后的样品需要包埋在硬化材料中，以提供支撑和保护。用于 SEM 的常见包埋材料包括树脂和蜡。样品浸入液态包埋材料中，然后硬化，形成固体块。这使样品易于处理和显微成像。

树脂包埋

树脂包埋提供了优异的支撑和渗透性。适用于大多数生物样品和高分辨率成像。然而，树脂包埋过程相对耗时，可能需要几个小时甚至几天。

蜡包埋

蜡包埋是一种更快速、更简单的方法。它适用于需要快速处理的样品和低分辨率成像。然而，蜡的渗透性不如树脂，可能导致样品的收缩和变形。

切片

包埋后的样品需要切片成超薄切片，厚度为几纳米到几微米。切片可以手动或使用超显微刀进行。切片厚度将影响 SEM 图像的质量和分辨率。

表面处理

在显微成像之前，载玻片的表面需要进行处理，以改善导电性和防止静电荷积聚。常用的表面处理方法包括金或碳喷涂。这创造了一个导电层，允许电子束在不偏转的情况下穿透样品。

载玻片制备是 SEM 制样过程的关键步骤，需要仔细执行以获得高质量的显微图像。通过遵循本指南中概述的步骤，研究人员可以确保他们的样品妥善准备，以便在显微镜下进行详细观察。

2024-11-08

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