细胞扫描电镜 (SEM) 平坦处理指南240

扫描电镜 (SEM) 是一种强大的成像技术，可提供细胞三维结构的详细视图。然而，在对细胞进行 SEM 成像之前，通常需要对其进行扁平处理，以优化图像质量并使细胞更容易观察。

为什么要进行细胞 SEM 扁平处理？

细胞 SEM 扁平处理有几个原因：

* 去除细胞容积：细胞在自然状态下具有三维形状，这可能会阻碍 SEM 成像，因为某些部分可能被其他部分遮挡。* 改善粘附：未经处理的细胞可能难以粘附到 SEM 样品台，这可能会导致成像问题。* 增强导电性：SEM 需要样品具有导电性以便成像。扁平处理有助于增加样品的导电性，从而产生更清晰的图像。

细胞 SEM 扁平处理步骤

细胞 SEM 扁平处理通常涉及以下步骤：

1. 固定和脱水

* 用戊二醛或福尔马林等固定剂固定细胞。* 使用一系列乙醇溶液脱水细胞，从 50% 到 100%。

2. 关键点干燥

* 将细胞转移到临界点干燥机中，使用液态二氧化碳作为过渡介质。* 随着温度和压力改变，液态二氧化碳逐渐转化为气态二氧化碳，从而从细胞中去除水而不会造成损坏。

3. 安装和涂覆

* 将干燥的细胞安装在 SEM 样品台上，使用导电胶或碳胶带。* 使用一层薄的金或铂涂覆样品，以增加其导电性。

优化细胞 SEM 扁平处理

以下提示可帮助优化细胞 SEM 扁平处理：

* 选择合适的固定剂：不同类型的固定剂适合不同的细胞类型。选择一种不会损坏细胞膜或细胞器超微结构的固定剂。* 仔细脱水：彻底脱水对于去除细胞中的水至关重要，但过度脱水会导致细胞收缩或变形。* 使用新鲜的过渡溶液：临界点干燥过程中使用的液态二氧化碳应始终是新鲜的。旧的液态二氧化碳可能含有水分，从而导致细胞损坏。* 进行梯度涂覆：对于某些类型的细胞，分级涂覆可以减少涂覆层的厚度和样品的充电。

细胞 SEM 扁平处理是一种重要的技术，可以优化 SEM 成像的质量和准确性。通过仔细遵循本指南中概述的步骤，可以制作出高质量的细胞 SEM 样品，为研究细胞结构和功能提供宝贵的见解。

2024-10-25

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